Dalam usaha untuk mengelakkan Pencemaran silang semasa operasi, keperluan utama bagi Reka bentuk, pembinaan dan pengurusan operasi adalah:
1. rekabentuk dan pembinaan makmal, sistem kerja selamat atau prosedur operasi Standard Keselamatan hendaklah memenuhi keperluan semasa "keperluan umum bagi Makmal Biokeselamatan" GB19489.
2. PCR dibahagikan kepada empat bidang yang berfungsi mengikut langkah kerja, iaitu Ruang simpanan dan kawasan persediaan, Ruang penyediaan spesimen, kawasan pilihannya, dan kawasan analisis produk pilihannya. Jika alat Pendarfluor PCR masa nyata dilengkapi, kawasan analisis pilihannya dan produk boleh digabungkan. Setiap kawasan fungsian hendaklah ditandakan dengan jelas, dan peralatan dan artikel dalam bidang yang berbeza fungsi tidak boleh dicampur.
Arah aliran udara makmal PCR boleh dijalankan selaras dengan simpanan reejen dan kawasan penyediaan → spesimen penyediaan kawasan → kawasan pilihannya → diperkuatkan kawasan analisis produk untuk menghalang produk yang diperkuatkan daripada memasuki kawasan pra-diperkuatkan bersama-sama dengan aliran udara. Ia boleh dijalankan dengan cara mengurangkan tekanan udara daripada simpanan reejen dan kawasan penyediaan → spesimen persediaan kawasan → pilihannya Area → pilihannya analisis produk kawasan. Ia boleh dicapai dengan memasang peminat ekzos, peranti ekzos tekanan negatif atau kaedah lain yang boleh dilaksanakan.
3. memasuki setiap kawasan kerja harus mengikut satu arah, iaitu, penyimpanan reagen dan kawasan penyediaan → penyediaan spesimen kawasan → pilihannya Area → pilihannya analisis produk kawasan. Kawasan kerja yang berbeza (seperti warna yang berbeza) harus digunakan. Pekerja tidak boleh mengambil pakaian kerja apabila mereka meninggalkan setiap kawasan kerja.
4. pembersihan makmal perlu dijalankan dalam arah penyimpanan reagen dan ruang persiapan → penyediaan kawasan persediaan → pilihannya Area → kawasan analisis produk yang diperkuatkan. Kawasan eksperimen yang berbeza harus mempunyai peralatan pembersihan mereka sendiri untuk mencegah Pencemaran silang.
5. selepas kerja itu selesai, kawasan kerja mesti dibersihkan dengan segera. Permukaan bangku Makmal di kawasan kerja harus mampu bertahan pembasmian kuman dan kesan pembersihan bahan kimia seperti natrium hypochlorite. Ultraviolet irradiasi di permukaan bangku makmal harus mudah dan berkesan. Sejak jarak dan tenaga ultraviolet irsinaran yang sangat kritikal kepada kesan decontamis, lampu alih ultraviolet (254nm wavelength) boleh digunakan, dan selepas kerja selesai, ia boleh dilaraskan untuk irradiate dalam 60-90cm pada jadual eksperimen. Oleh kerana produk yang diperkuatkan hanya beberapa ratus atau puluhan pasangan asas (BP), ia tidak sensitif kepada kerosakan UV, jadi yang terhidrasi UV yang diperkuatkan mesti terhidrasi untuk masa yang lebih lama, sebaik-baiknya semalaman.
Fungsi penyimpanan semula dan kawasan penyediaan adalah: penyediaan ejen reagen, Pendispensan dan penyediaan campuran reaksi pilihannya, serta penyimpanan dan penyediaan bahan kegunaan seperti tiub centrifuge dan tips yang lain. Bahan seperti penyimpanan/agen simpanan dan digunakan untuk persediaan spesimen hendaklah dibawa terus ke stor simpanan dan ruang persiapan, dan tidak boleh melalui kawasan pengesanan pilihannya. Bahan kawalan positif dan bahan kawalan kualiti dalam Kit tidak boleh disimpan di kawasan ini, tetapi perlu disimpan di kawasan ini. Kawasan pemprosesan spesimen.
Fungsi dari kawasan penyediaan spesimen adalah: nukleik acid (RNA, DNA) pengekstrakan, penyimpanan dan menambah pilihannya reaksi tiub. Bagi operasi yang melibatkan sampel klinikal, keperluan peralatan perlindungan, perlindungan peribadi, dan spesifikasi operasi untuk makmal sekunder biokeselamatan perlu dipenuhi. Sejak pencemaran oleh aerosol mungkin berlaku semasa mencampurkan sampel dan penulenan asid nukleik, keadaan tekanan positif boleh ditubuhkan di kawasan ini untuk mengelakkan pencemaran aerosol dari kawasan jiran. Untuk mengelakkan pencemaran merentas antara sampel, selepas menambah asid nukleik untuk diuji, yang tindak balas tiub yang mengandungi campuran tindak balas mesti dilindungi. Bagi bahan berjangkit yang berpotensi, tudung mesti dibuka dalam Kabinet keselamatan biologi, dan mesti ada prosedur yang jelas untuk pengendalian sampel dan penyahaktifan.
Fungsi zon pilihannya adalah: sintesis DNA, pilihannya DNA dan pengesanan. Dalam usaha untuk mengelakkan pencemaran yang disebabkan oleh aerosol, berjalan di kawasan itu perlu dikurangkan. Ia harus diperhatikan bahawa semua tiub tindak balas yang diuji tidak boleh dibuka di kawasan ini.
Fungsi kawasan analisis produk yang diperkuatkan ialah: analisis lanjut dan penentuan serpihan yang diperkuatkan, seperti hybridiluran, Elektrophoresis penghadaman, sistem analisis cecair prestasi tinggi, penjujukan dan sebagainya. Nukleik asid pilihannya produk mempunyai pelbagai kaedah analisis, seperti kaedah probe Ontologi mengenai membran atau di atas mikropinggan atau cip (radionuclide pelabelan atau bukan radioaktif yang pelabelan nuclide), langsung atau dicerak agarose gel Elektrophoresis, Polyacrylamide gel Elektrophoresis, pengangkutan Selatan, nukleik asid penjujukan kaedah, Spektroskopi Massa, dan sebagainya.
Kawasan analisis produk pilihannya adalah sumber utama pencemaran produk pilihannya dalam makmal PCR, jadi penjagaan perlu diambil untuk mengelakkan menjalankan produk pilihannya melalui artikel dan pakaian kerja di kawasan ini. Apabila menggunakan kaedah PCR-ELISA untuk mengesan produk yang diperkuatkan, Mesin basuh pinggan mesti digunakan untuk mencuci pinggan, dan cecair sisa mesti dikutip dalam 1 mol/L HCl, dan tidak boleh dicurahkan di makmal, tetapi perlu dibuang dari makmal PCR. Senarai drop. Petua yang digunakan juga mesti direndam dalam 1 mol/L HCl dan kemudian diletakkan di dalam beg sampah untuk pelupusan mengikut prosedur, seperti pembakaran. Oleh kerana kawasan ini boleh menggunakan mutasi genetik dan bahan toksik seperti ethidium bromide, acrylamide, formaldehid atau radionuclides, dan lain-lain, perlindungan keselamatan eksperimen perlu diberi perhatian.